کیت غربالگری مهار کننده آنزیم آنژیوتانسین II (ACE2)
کیت غربالگری مهار کننده آنزیم آنژیوتانسین II (ACE2)
آنزیم تبدیل آنژیوتانسین II(ACE2, EC 3.4.17.23)، کربوکسی پپتیداز بخشی از سیستم رنین-آنژیوتانسین است که کنترل فشار خون را با پاک کردن دیپپتید C- ترمینال آنژیوتانسین II کنترل می کند تا آن را به آنژیوتانسین 1-7 تبدیل کند. همچنین ، آنژیوتانسین I را تولید می کند تا عملکرد Ang 1-9 را با عملکرد ناشناخته تولید کند. ACE2 گیرنده انسدادی ویروسهای انسانی مانند SARS و HCoV-NL63 است. در سلولهای اندوتلیال عروقی قلب و کلیه بیان می شود. مهار کننده های ACE2 می توانند فشار خون را با تغییر نفوذپذیری عروقی تنظیم کنند. غربالگری برای مهار کننده های مولکول کوچک و پپتید نیز ممکن است در یافتن درمان به واسطه عفونت کروناویروس کمک کند. کیت غربالگری مهارکننده ارزیابی ژنی ACE2 می تواند برای غربالگری مهار کننده های قوی فعالیت ACE2 استفاده شود، از توانایی ACE2 فعال در برش بستر پپتید مصنوعی مبتنی بر MCA برای رهاسازی فلوروفور آزاد استفاده می شود. MCA منتشر شده را می توان به راحتی با استفاده از دستگاه میکروپلیت فلورسانس اندازه گیری کرد. در حضور یک مهار کننده خاص ACE2 ، آنزیم فعالیت پپتیداز خود را از دست می دهد که منجر به کاهش شدت فلورسانس می شود. این کیت سنجش ساده است و می تواند برای شناسایی و توصیف مهارکننده های ACE2 در یک فرمت با توان عملیاتی بالا استفاده شود.
شکل: مهار فعالیت ACE2 توسط ACE2 Inhibitor ، IC 50 = 33.0 ± 0.6 نانومتر (3 نفر). سنجش پس از پروتکل کیت انجام شد.
شکل: مهار فعالیت ACE2 توسط مهارکننده ACE2، IC 50 = 33.0 ± 0.6 نانومتر (3 نفر). سنجش به تبعیت از پروتکل کیت انجام شد.
توضیحات | اطلاعات کلیدی |
BN00569 |
محصول SKU |
تست100 |
سایز |
فلورسانس (Ex / Em = 320/420 نانومتر) |
روش تشخیص |
ACE2 غربالگری / نمایانگر / مطالعه مهارکننده ها و فعال کننده های |
کاربردها |
|
ویژگی ها و مزایا |
|
اجزای کیت |
-20°C |
شرایط نگهداری |
بسته ژل |
شرایط حمل و نقل |
فقط برای استفاده از تحقیقات! برای استفاده در انسان نیست. |
استفاده |
ACE2 عملکرد
کربوکسیپپتیداز که آنژیوتانسین I را به آنژیوتانسین 1-9 تبدیل می کند ، یک پپتید با عملکرد ناشناخته و آنژیوتانسین II به آنژیوتانسین 1-7 ، وازودیلاتور (PubMed:10969042, PubMed:10924499, PubMed:11815627). همچنین قادر به تجزیه کردن آپلین 13 و دینورفین 13 با راندمان بالا است (PubMed: 11815627). با جدا شدن آنژیوتانسین II ، ممکن است یک تنظیم کننده مهم عملکرد قلب باشد (PubMed: 10969042 ، PubMed: 10924499). با جدا شدن آنژیوتانسین II ، ممکن است نقش مهمی در آسیب حاد ریه ها داشته باشد (با شباهت). نقش مهمی در انتقال اسیدهای آمینه با ایفای نقش به عنوان شریک اتصال دهنده حمل کننده اسید آمینه SL6A19 در روده ، تنظیم فعالیت غیر مجاز ، حالت در سطح سلول و فعالیت کاتالیزوری آن بازی می کند (PubMed: 18424768 ، PubMed: 19185582).
ACE2 و کروناویروس
آنزیم 2 (ACE2) تبدیل کننده آنژیوتانسین مشخص شده است که یک گیرنده عملکردی است که جذب SARS-CoV-2 را به سلول های میزبان تسهیل می کند. (منبع) ACE2 در مکانهای مختلف و انواع سلول بیان شده است ، از جمله سلولهای اپیتلیال آلوئول ، انتروسیتهای سطحی در روده کوچک و سلولهای اندوتلیال قلب و کلیه.
ورود کروناویروس به سلولهای مستعد توسط زیر واحد S1 گلیکوپروتئین تراغشایی کروناویروس صورت میگیرد (معمولاً به اختصار "S" بیان میگردد). (منبع) S1 حاوی یک دامنه اتصال دهنده گیرنده در باقیمانده 318-510 ، که به مانده LYS341 ACE2 با قرابت وابستگی بالا می شناسد متصل می شود. (منبع) وابستگی CoV-2 نسبت به CoV بیشتر است. (منبع)
افزایش میل اتصال به ACE2 انسانی با افزایش راندمان انتقال در شیوع قبلی SARS-CoV ارتباط دارد. (منبع) آنتی بادی های تولید شده علیه SARS-CoV-2 زیر واحد S2 را هدف قرار می دهد ، که مسئول همجوشی غشای ویروسی و میزبان است. بنابراین ، خنثی سازی زیر واحد S2 مانع ورود ویروسی به سلول های آسیب پذیر می شود. (منبع) آنتی بادی های پلی کلونال در برابر پروتئین S از SARS-CoV نشان داده شده است که به طور قابل توجهی توانایی SARS-CoV-2 برای ورود به سلول از طریق ACE2 انسانی کاهش می دهد. (منبع)
اطلاعات کلیدی | ACE2 | |
یونیپروت |
||
ACE2 |
نام ژن |
|
آنزیم تبدیل آنژیوتانسین 2 ، کربوکسی پپتیداز مربوط به ACE ، هومولوگ آنزیم تبدیل کننده آنژیوتانسین ، ACEH ، Metalloprotease MPROT15
|
نامهای جایگزین |
|
ناحیه خارج سلولی یا ترشح شده ، غشای سلولی ، سیتوپلاسم |
محل درون سلولی |
|
|
ویژگی بافت |
|
در قلب نامنظم تنظیم می شود. |
القاء |
کیت سنجش فعالیت ACE 2 – پروتکل
روش | گام |
198 میکرولیتر از بافر رقیق کننده ACE2 را به ویال آنزیم ACE2 اضافه کنید. آنزیم رقیق شده می تواند
|
آماده سازی محلول کاری آنزیم ACE2: |
کاندیدای مهارکننده های حل شده در 100 برابر بالاترین غلظت تست نهایی با استفاده از حلال مورد نظر. غلظت تست مورد نظر را با 10 برابر غلظت تست بافر رقیق کننده ACE2 کنید. 10 مهارکننده آزمایش میکرولیتر (نمونه ، S) یا بافر سنجش ACE2 (EC و BC) اضافه کنید. با افزودن 50 میکرولیتر از بافر سنجش ACE2 به ویال حاوی ACE2 مهارکننده ، مهار كنترل بازدارنده را آماده كنید. رای کنترل بازدارنده (IC) ، 10 میکرولیتر از مهار کننده ACE2 را به ظرف (های) حاوی آنزیم ACE2 اضافه کنید. برای مدت زمان 15 دقیقه در دمای اتاق (RT) انکوبه کنید. |
ترکیبات غربالگری ، مهارکننده های مهار کننده و آماده سازی کنترل آنزیم: |
برای تعداد سنجش هایی که باید انجام شود معرفهای کافی را آماده کنید. برای هر چاه ، 40 میکرولیتر از بستر مخلوط تهیه کنید:
40 میکرولیتر از مخلوط بستر ACE2 را به چشمان کنترل پس زمینه ، کنترل آنزیم / کنترل حلال ، کنترل مهارکننده و نمونه (S) مخلوط کرده و اضافه کنید. خوب مخلوط کنید. |
مخلوط لایه ACE2 |
فلورسانس (Ex / Em = 320/420 نانومتر) را در حالت جنبشی به مدت 1 ساعت در دمای اتاق اندازه گیری کنید. |
اندازه گیری: |
Recent Posts
-
Immunoglobulins: Structure, Function, and Clinical Importance
Immunoglobulins (Igs), also known as antibodies, are glycoproteins produced by B cells …20th Nov 2024 -
Boiling Proteins for Western Blotting: Optimal Conditions and Best Practices
Boiling proteins is a critical step in preparing samples for Western blotting, a techn …20th Nov 2024 -
Treponema pallidum Antibodies: Comprehensive Guide to Diagnostic and Clinical Relevance
Treponema pallidum, the causative agent of syphilis, triggers an immune response that …20th Nov 2024